技术原理-微流控扩散
使用微流控分析芯片将荧光标记的蛋白质样本送入。 蛋白质液流和辅助流是平行流动的,因为没有对流混合,蛋白质迁移到辅助流的唯一方式是扩散,扩散的速度取决于蛋白质的大小。相对分子质量小的蛋白质扩散快,相对分子质量大的蛋白扩散慢。 液流被重新分割,而此时扩散的程度已经固定。通过标记在蛋白质上的荧光可以确定每条液流中蛋白质的数量。两条液流中的荧光比值给出了蛋白质的流体动力学半径(Rh)。 使用有荧光标记的蛋白质和未标记的结合物所组成的混合物进行实验, Rh 的改变说明有分子结合事件发生。测量不同浓度结合物的流体动力学半径(Rh),可以得到结合曲线,并且自动计算KD值。
使用SPR,MST,ITC和MDS四种技术比较PD-1/PD-L1相互作用的亲和力

对比了 MSD 和 ITC 、 SPR 以及 MST 方法测得的 KD 值 ,在同一数量级上,无明显差异!


应用领域
应用案例

 


1. Our in-solution assay allows for the direct measurement of virus spike displacement from the ACE-2 receptor in the presence of neutralizing antibodies




 




2. Antibody testing in minimally diluted serum for maximum sensitivity






 




3. Microfluidic Antibody Affinity Profiling